中国协和医 科大学联合出版社

多发性硬化脑苷酯抗体检测

脑与神经疾病杂志 2000年第2期第8卷 短篇与病例报告

作者:林艾羽 吴秀丽 慕容慎行 许国英 林嘉友

单位:林艾羽( 福建医科大学附属第一医院神经内科);吴秀丽( 福建医科大学附属第一医院神经内科);慕容慎行( 福建医科大学附属第一医院神经内科);许国英( 福建医科大学附属第一医院神经内科);林嘉友(中国医学科学院)

脑苷酯是一种髓鞘成分,存在于神经元表面,调节多种神经过程。在脱髓鞘的情况下,csf中各种抗体增加,也包括脑苷酯抗体[1]。为了进一步探讨ms的自身免疫机制,我们检测了ms患者血清和csf脑苷酯抗体。

资料和方法 1.一般资料 实验组20例,均来自我科住院确诊的ms病人,符合poster等的诊断标准[2];男9例,女11例,年龄21~54岁,平均34岁,病程6月~9年,平均17.1月。临床主要表现为视力障碍,肢体麻木无力,行走不稳。辅助检查包括诱发电位、ct或mri。对照组血清采自15例健康成人,脑脊髓液取自非神经系统疾病的外科手术行腰麻的病人。实验组和对照组成员分别抽取1ml脑脊髓液;抽取2ml外周血,离心后取其上清液,均保存于-20℃。

2.方法 采用改良marcus法[3]。将脑苷酯(10ug/50ul)包被于聚苯乙每孔包被50ul,4℃过夜,晾干;用1%bsa-pbs封闭,每孔100ul,封闭4~6小时;用0.15mpbs洗3×5’(简称洗3次);加1∶80稀释待测血清,4℃过夜。洗3次;加结合物mah-ig-hrpo(1∶2000稀释),置4℃6小时,洗3次;加底物液:底物缓冲液10ml,邻苯二胺(opd)4mg,30%ho216ul,室温放置15’2mhso4每孔20ul终止反应;于492nm测定od值。

3.统计学检验 采用t检验,以大于x+2sd为阳性标准。

结 果 1.在血清检验中,20例ms患者脑苷酯抗体阳性14例(阳性率70%);在脑脊液中,20例ms患者脑苷酯抗体阳性14例(阳性率70%)。

2.经统计学检验,以上两组两种抗体的水平在ms组和对照组间差异均有显著性意义。

讨 论 ms患者体内同时存在着细胞免疫异常和体液免疫异常,ms病人的外周血对脑组织抗原(mbp、神经节苷酯、脑苷酯)有特异性细胞免疫应答。

n(个)

脑苷酯抗体(od)

p值

ms组

血清

19

0.7930±0.3960

p<0.01

csf

19

0.6985±0.1838

p<0.01

hc组

血清

15

0.4213±0.1397

csf

15

0.3393±0.1290

本研究旨从体液免疫角度出发,了解在急性期ms病人血清及csf中除mbp抗体、神经节苷酯抗体外,脑苷酯抗体的存在情况。本研究对20例急性期ms病人的csf及血清脑苷酯抗体进行了检测并与对照组相比较,以大于对照组x+2sd为阳性标准,结果显示患者组csf及血清中此二抗体均有70%的阳性率。说明此抗体同mbp抗体、神经节苷酯抗体一样,在急性期对反应病情的活动有一定帮助,进一步对ms的可能发病机制作出了阐明,该病的发病可能由于感染等原因,使得针对自身组分的mbp、神经节苷酯、脑苷酯等自身免疫机制被激活,体液免疫和细胞免疫共同参与的免疫应答过程,选择性地攻击中枢神经白质,导致一系列的病理变化和临床过程。

本实验通过对ms血清及脑脊液脑苷酯抗体的检测,补充说明了髓鞘脂质抗体在脱髓鞘活动期同样参与ms的发病过程。csf中这些抗体的存在反应了神经系统的体液免疫状态,乃神经系统炎性脱髓鞘疾病的机理。早年发现mscsfigg增高,toutellotte通过计算发现其鞘内igg合成增高证明ms病人神经系统有体液免疫学异常。关于脑脊液抗体的来源以及与血清抗体的关系,人们提出了中枢神经系统内部本身可以合成免疫球蛋白的说法[4]是因为ms病人外周产生特异性抗体的免疫活性b细胞可以通过遭破坏的血脑屏障,进入中枢神经系统产生特异性抗体。参考文献

1 许贤豪. 神经免疫学. 第1版. 北京医科大学. 中国协和医 科大学联合出版社, 1995;10∶177-182.

2 poster cm. patty dw, scheiberg l, et al. new diagnostic criteria for multiple sclerosis:guidelines for research protocols. ann neural. 1983; 13∶227.

3 marcus dm, latte n, hsi bp, gillard bk measurement and significance o f antibodies against gm1 ganglioside. neuroimmuno, 1989 dec; 25(2-3)∶255-9.

4 楚兰等. 24小时鞘内igg合成率检测的临床意义. 卒中和神经疾病, 1998, 9( 4).

(1999-07-10 收稿)









































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